Ksantoproteinovaya reago al proteino: signojn kaj formulo ekvacio

Por establi la kvalita komponaĵo de multaj nutraĵoj uzataj ksantoproteinovaya reago al la proteino. La ĉeesto de aminoácidos aromáticos en la miksaĵo ŝanĝos en pozitiva testo specimeno koloro.

Kio estas proteino

Ĝi estas ankaŭ nomita proteino, kiu estas konstrumaterialo por la viva korpo. Proteinoj subteni muskolo grandeco, restarigi la vunditan kaj mortinta histo strukturoj de diversaj organoj, ĉu haroj, haŭto kaj ligamentoj. Kun ilia partopreno, produktas ruĝan sangon korpuskloj, estas regita de la normala operacio de multaj hormonoj kaj imunsistemo ĉeloj.

Ĝi estas kompleksa molekulo kiu estas polipéptido havanta mason pli grandan ol 6 ~ 10 ³ Daltons. Proteina strukturo formante aminoácido restaĵoj en grandan nombron da kuplita ligo peptídico.

La strukturo de la proteinoj

La karakteriza karakterizaĵo de ĉi tiuj substancoj kompare kun malalta molekula pezo péptidos estas ke ili disvolvis tridimensia spaca strukturo, subtenataj efektoj kun diversaj gradoj de altiro. Proteinoj posedi kvar-strukturo. Por ĉiu el ili havas sian propran karakterizaĵoj.

Kiel la bazo de la ĉefa organizo de la molekuloj derivita sekvenco de aminoácidos, strukturo kiu rekonas ksantoproteinovaya reago al la proteino. Tiu strukturo estas periode ripeti ligo peptídico -HN-CH-co, selektitajn parto radikaluloj estas la flankaj ĉenoj en aminoácidos. Ili difinas pli ecoj de la substanco kiel tuto.

La ĉefa proteino strukturo estas konsiderata sufiĉe forta, ĉi tiu estas pro la ĉeesto de fortaj kovalentaj interagoj en ligoj peptídicos. La formado de postaj niveloj okazas depende de la atributoj starigis en la komenca stadio.

La formado de la malĉefa strukturo eblas pro tordanta de la sekvenco de aminoácidos en espiral, en kiu hidrogeno estas establita inter la turnoj.

Terciario nivelo organizo de molekuloj formitaj de apliki unu el spirala sur la alia fragmentoj kun la okazo de ĉiuj eblaj rilatoj inter ili, kun hidrogeno, disulfuro, kovalentaj aŭ jonaj ligoj. La rezulto estas la asocio en la formo de globuloj.

La spaca aranĝo de la terciaraj strukturoj kun la formado de kemiaj ligoj inter ili kondukas al la formado de la fina formo de la molekulo aŭ cuaternario niveloj.

aminoácidos

Ili kaŭzas la kemiajn proprietojn de la proteinoj. Ekzistas proksimume 20 gravaj aminoacidoj farante supren la polipéptidos en malsama sinsekvo. Tiu ankaŭ estas referita maloftaj aminocarboxylic acido en la formo hydroxyproline kaj hydroxylysine derivita baza peptide.

Kiel signo de rekono ksantoproteinovaya proteino reago, la ĉeesto de certaj aminoacidoj provizas la koloro ŝanĝo de reactivos, sugestante la ĉeeston de specifaj strukturoj en lia komponado.

Kiel ĝi rezultis, ili estas acidaj carboxílicos kiuj okazis anstataŭigo de atomo de hidrogeno en la amino grupo.

Ekzemplo strukturo de la molekulo povas servi strukturan formulo glicina (HNH- HCH- COOH) kiel la plej simpla aminoacido.

En ĉi tiu kazo unu el la hidrogenoj CH ₂ - povas esti anstataŭigita de karbono pli longa radikala konsistanta benzeno ringo, amino, sulfo, carboxy.

Kio faras ksantoproteinovaya reago

Por kvalita analizo de proteinoj uzante diversaj teknikoj. Tiuj inkludas reagojn:

• biuret kun la apero de viola koloro;
• ninhydrin formi bluan-viola solvo;
• formaldehido kun la starigo de ruĝa koloro;
• Nogier precipitar la griza-nigra koloro.

Plenumante ĉiu metodo pruvis la ĉeeston de proteinoj kaj la ĉeesto de certaj funkciaj grupoj en ilia molekulo.

Tie ksantoproteinovaya reago al la proteino. Pro tio ankaŭ la rompo Mulder. Ĝi rilatas al la koloro reagoj por proteinoj, en kiuj estas aromáticas kaj heterocíclica aminoácidos.

Karakterizaĵo de tia specimeno procezo estas nitración acida nítrico cikla aminoácido restaĵoj precipe la surtroniĝo de la nitro grupo por la benzeno ringo.

La rezulto de ĉi tiu procezo estas la formado de nitro komponaĵoj, kiu ekigis. Tiu estas la baza trajto ksantoproteinovaya reago.

Kio decidita la aminoácido

Ne ĉiuj aminocarboxylic acido povas detekti uzanta tia specimeno. La ĉefa trajto de ksantoproteinovaya proteino malkaŝo reago - la ĉeesto de la benzeno ringo aŭ heterocíclica ringo en la molekulo aminoácidos.

Ĉar la proteino estas izolita de aminocarboxylic acidoj du aromaj, en kiu estas fenilo grupo (por fenilalanina), kaj hydroxyphenyl radikalaj (en tirozino).

Kun ksantoproteinovaya reago estas difinita heterocíclica aminoácido triptofano, indole havanta aromaj nukleo. La ĉeesto de la supre komponaĵoj en la proteino donas la karakterizan koloron ŝanĝo de la testo medio.

Kio uzo reactivos

Por efektivigi la reagon ksantoproteinovaya bezonas prepari 1% solvo de ovo proteino, aŭ vegetala origino.

Kutime uzita ovon, kiu estas dividita por plua disiĝo de la proteino de la yema. Dum 1% solvo de proteino diluis en dekobla kvanto de purigita akvo. Post malfondo de la rezultanta proteino likva estu filtrita tra pluraj tavoloj de cheesecloth. Tiu solvo devus esti stokita en malvarma loko.

Eblas realigi la reago kun legomo proteino. Prepari la solvo estas uzata faruno de tritiko en sumo de 0.04 kg. 0.16 l de purigita akvo. La ingrediencoj estis miksitaj en flakono kiu estas ligita por 24 horoj en malvarma loko al temperaturo de proksimume + 1 ° C. Fine de la tago, la solvo cxagrenigxis, sekvita de filtration ĝia unua kun kotono lano kaj poste - paperan faldita filtrilo. La likva resultante estis tenata en malvarma loko. Tiu solvo estas ĉefe ĉeestas en la albumino frakcio.

Por efektivigi la reagon ksantoproteinovaya kiel la ĉefa reakciilo uzita acida nítrico Conc. Plue reactivos estas solvaĵo de 10% hidróxido de natrio aŭ amoniako, la gelateno solvo kaj unconcentrated karbolo.

La metodiko de la

En pura tubon estas farita 1% proteino solvo -a ovojn aŭ faruno en sumo de 2 ml. Al ĉi tio adicias ĉirkaŭ 9 gutoj de koncentrita acida nítrico al floculación haltis. La rezulta miksaĵo estis varmigita, rezultanta flava precipitado grade malaperas kaj lia koloro iras en solvo.

Kiam la likva malvarmigas malsupren en la tubon sur la muro aldonis ĉirkaŭ 9 gutoj de hidróxido de natrio, koncentritaj, kio estas dibocxo por la procezo. La reago meza iĝas alkalaj. Enhavo iĝas oranĝa koloro en la provtubo.

trajtoj de

Ekde ksantoproteinovaya nomita kvalita reago al acida nítrico por la agado de la proteinoj, la specimeno estas farata sub inkluzivita fume kapuĉo. Observu cxiujn sekureco singardecojn kiam laboranta kun koncentrita cáusticas substancoj.

La ĵeto de la enhavo de la tubo povas okazi dum la hejtado procezo kiu devas esti konsiderata al la fiksi ĝin en posedanto kaj elektante la deklivo.

Markante de koncentrita acida nítrico kaj acida sodo devus nur uzi glason pipeta kaj pirojn kaŭĉuko malpermesitaj pipeta de buŝo.

Relativa reago kun karbolo

Por klareco, procezo kaj konfirmo de la ĉeesto de la fenilo grupoj efektivigas kun simila specimeno hydroxybenzene.

La tubo farante 2 ml de diluita karbolo, tiam iom post iom laŭlonge de la muro, estis aldonita 2 ml de koncentrita acida nítrico. La solvo estis submetita al hejtado, per ĝi fariĝas flava. Tiu reago estas la kvalito de la ĉeesto de la benzeno ringo.

Procezo hydroxybenzene nitrated kun acida nítrico sekvita de formado de miksaĵo de p-nitrophenol kaj o-nitrophenol en procento de 15 al 35.

Komparo testo kun gelateno

Por pruvi ke ksantoproteinovaya reago al la proteino malkaŝas aminoácido kun aromaj strukturo, uzu proteinojn kiuj ne havas fenólicos grupo.

En pura tubon estas farita 1% gelateno solvo en sumo de 2 ml. Al ĉi tio adicias ĉirkaŭ 9 gutoj de koncentrita acida nítrico. La rezulta miksaĵo hejtas. La solvo ne estis koloraj en flava, kiu pruvas la foreston de aminoácidos kun aromaj strukturo. Kelkfoje estas malpeza amarilleando de la medio pro la ĉeesto de proteino malpuraĵoj.

kemiaj ekvacioj

En la du paŝo reago kuras ksantoproteinovaya proteinojn. Formulo unua stadio nitración procezo priskribas aminoácido molekuloj uzanta koncentrita acida nítrico.

Ekzemplo estas la alligiteco de la nitro grupo por la tirozino formi nitrotyrosine kaj dinitrotirozina. En la unua kazo al la benzeno ringo estas ligita unu NE ₂ -radical, la dua komponaĵo havas du hidrogeno atomoj estas anstataŭitaj de NE _2. Kemia formulo ksantoproteinovaya tirozino reagon reprezentita de reago kun la acida nítrico por formi nitrotyrosine molekulo.

Nitración procezo estas akompanita de transiro senkolora koloro en flava tono. Plenumante tiun reagon kun proteinoj enhavantaj la aminoácido restaĵoj fenilalanina aŭ triptofano, kaj koloro de la solvo ŝanĝoj.

La dua paŝo estas la reago de produktoj de nitración de tirozino molekuloj, precipe nitrotyrosine, kun amonio aŭ hidróxido de natrio. La rezulto estas natrio aŭ amonio salo en kiu la flava-oranĝo koloro. Tia reago rilatas al la ebleco de nitrotyrosine molekuloj movi en la quinoid formon. Sinsekve salo formis el ĝi nitronic acido, kiu havas quinone sistemo de duoblaj ligoj konjugaciitaj.

Tiel finiĝas ksantoproteinovaya reago al proteinoj. La ekvacio prezentitaj supre dua paŝo.

rezultoj

Dum la analizo de fluidoj enhavas la tri tubojn, la referenco solvo estas diluita kun karbolo. Substancoj kun benzeno ringo donas kvalitan reago kun acida nítrico. Rezulte, ĝi ŝanĝas koloron de la solvo.

Kiel estas konata, gelateno konsistas hidrolizar formo de colágeno. La proteino ne enhavas la aromaj strukturo de la aminoácidos. Neniu ŝanĝo en koloro de la meza por reago kun acida.

En la tria provo tubon estas pozitiva reago al proteinojn ksantoproteinovaya. Konkludo povas esti tirita jene: ĉiuj proteinoj kun aromaj strukturon, cxu gxi estas fenilo grupo aŭ indole ringo, donita la ŝanĝon en koloro de la solvo. Ĉi tio estas pro la formado de nitro komponaĵoj kun flava koloro.

Efektivigi koloro reago pruvas la ĉeeston de diversaj kemiaj strukturoj en aminoacidoj kaj proteinoj. EKZEMPLO gelateno montras ke lia komponado inkludas aminocarboxylic acido ne havanta fenilo grupo aŭ cikla strukturo.

Kun ksantoproteinovaya reago povas esti klarigita de amarilleando de la haŭto kiam aplikita al ĝi fortan acida nítrico. La sama koloro fariĝos ŝaŭma lakto dum ŝia simila analizo.

En laboratorio clínico praktiko tiu koloro specimeno ne estas uzata por la detección de proteino en la urino. Ĉi tio estas pro la flava koloro de la urino mem.

Ksantoproteinovaya reago iĝis ĉiam pli uzitaj por cuantificación de aminoácidos, kiel triptofano kaj tirozino, kiel parto de diversaj proteinoj.